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微生物培養(yǎng)基常規(guī)滅菌方法

更新時(shí)間:2018-07-30  |  點(diǎn)擊率:2172

          在發(fā)酵過程中,培養(yǎng)基滅菌主要有以下幾個(gè)原因:如不滅菌,會使生物反應(yīng)的基質(zhì)或產(chǎn)物,因雜菌的消耗而損失,造成生產(chǎn)能力的下降;雜菌也會產(chǎn)生代謝產(chǎn)物,這就使產(chǎn)物的提取更加困難,造成得率降低,產(chǎn)品質(zhì)量下降;雜菌大量繁殖后,會改變反應(yīng)液的pH值,使反應(yīng)異常;有些雜菌會分解產(chǎn)物,使生產(chǎn)失敗;如果發(fā)生噬菌體污染,生產(chǎn)菌細(xì)胞將被裂解,使生產(chǎn)失敗。

常見的滅菌方法

(一)化學(xué)物質(zhì)滅菌

      原理:藥物與微生物細(xì)胞中的成分反應(yīng),使蛋白質(zhì)變性酶失活。使用范圍:器皿、雙手和實(shí)驗(yàn)室、無菌室的環(huán)境滅菌,不能用于培養(yǎng)基滅菌。

       常用的滅菌劑:甲醛 37%  戊二醛 2%  高錳酸鉀 0.1%-0.25%   苯酚 0.1%-0.15%

       漂白粉 5%   過氧乙酸 0.02%-0.2%  酒精 75%   焦碳酸二乙酯 0.01%-0.1%  煤酚皂(來蘇爾) 1%—5%

(二)輻射滅菌

       輻射滅菌的原理是利用高能量的電磁輻射與菌體核酸的光化學(xué)反應(yīng)造成菌體死亡。常用的有紫外線、X射線和γ射線。用于室內(nèi)空氣及器皿表面滅菌。

(三)干熱滅菌

       滅菌原理是利用高溫對微生物有氧化、蛋白質(zhì)變性和電解質(zhì)濃縮作用而殺滅微生物。常用灼燒和電熱箱加熱,140-180℃ 1-2小時(shí)。適于對玻璃及金屬用具及沙土管滅菌,喆圖小編推薦-干熱滅菌箱。

(四)濕熱滅菌

      滅菌原理是直接用蒸汽滅菌,蒸汽在冷凝時(shí)能釋放出大量潛熱,蒸汽具有強(qiáng)大的穿透力,破壞菌體蛋白和核酸的化學(xué)鍵,使酶失活,微生物因代謝障礙而死亡。水煮常壓滅菌:100℃?;蝻柡驼羝麥缇阂话?21℃,30分鐘。適合培養(yǎng)基和發(fā)酵設(shè)備滅菌。

(五)過濾除菌

       除菌原理是利用微生物不能透過濾膜除菌。方法是使用0.01~0.45 mm孔徑濾膜,用于壓縮空氣、酶溶液及其他不耐熱化合物溶液除菌。

       在工業(yè)生產(chǎn)中,對于培養(yǎng)基、管道、設(shè)備的滅菌,通常采用蒸汽加熱到一定的溫度,并保溫一段時(shí)間的滅菌方法,稱之為濕熱滅菌。濕熱滅菌的顯著優(yōu)點(diǎn)是:使用方便,無污染,而且其冷凝水可以直接冷凝在培養(yǎng)基中,也可以通過管道排出。

結(jié)束語:培養(yǎng)基滅菌大多數(shù)用濕熱滅菌。衡量熱滅菌的指標(biāo)很多,常用的是“熱死時(shí)間”,即在限定的溫度下殺死原有微生物中一定比例所需的持續(xù)時(shí)間。影響熱滅菌的溫度和時(shí)間的因素很多,包括:微生物種類、性質(zhì)、濃度和培養(yǎng)基的性質(zhì)、濃度等。

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